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日前,在蜜環菌母種制作過程中,不管是菌種制作廠家還是天麻種植者,大多采用傳統的PDA、PDA加富、PDA+黃豆粉等培養基,這些傳統的培養基有許多不足之處:①不能為蜜環菌提供充分的營養來源;②由于蜜環菌是喜濕性菌類,在培養基上更易于吸收游離態的水,但傳統的瓊脂培養基以結合態水為其主要存在形式,因此不能很好地為其提供所需的水分,致使蜜環菌的生長受到一定的抑制;③在瓊脂培養基上,很容易產生褐化及蜜環菌的角質化(都是蜜環菌退化的標志);④在偏遠地區,由于難于買到瓊脂,生產者想要制作母種,必然會受到很大限制。筆者針對以上這些缺陷,經過長期的培養基優選試驗,總結出簡易的蜜環菌母種制作技術,該法不需瓊脂,但能克服以上缺點。現將制作技術介紹如下: 1.培養基配方。玉米粉120克,黃豆粉20克,蔗糖(白糖)20克,水1000毫升。 2.培養基制作。先將稱量好的玉米粉、黃豆粉用適量水調勻,再添足水煮制,待煮沸時開始記時,保持35分鐘即可,注意在加熱過程中需不時攪拌,以免煮糊,注意添水,以補充加熱過程中損失的水分。 煮好后加入所需的蔗糖,趁熱采用注射筒或其他裝置分裝,分裝后塞好棉塞,將試管豎直放置。由于該培養基營養相當豐富,再加上玉米粉徹底滅菌相對較難,因此滅菌時間應比常規培養基稍長一點,一般將其控制在高壓條件下(1.5千克/平方厘米)滅菌35分鐘--40分鐘、常壓滅菌60分鐘--90分鐘即可。滅菌完成后,待冷卻至試管不燙手時將其取出,豎直放置(蜜環菌母種培養基一般做成柱式),待完全冷卻后,培養基在試管內就徹底凝固了。 3.接種培養與保藏。在無菌條件下,每支試管接入一豌豆粒大小的菌種塊,所接菌種必須保證具有生活力,培養基褐化、菌素嚴重角質化的菌種勿用。接種后置于25℃溫度下避光培養,一般在7天--10天后,菌絲即可滿管。菌絲滿管后將菌種放于冰箱中冷藏,一般可保存半年至一年,若需長時間保藏,可將試管口蠟封。 采用以上方法制作母種,具有以下優點:①制種原料簡單、易找,制種技術簡便、易操作,制作成本低廉。②由于培養基改善了水分的供給狀況,且營養相當豐富,再加上玉米粉、黃豆粉中含有多種生長因子,因此所制母種菌索粗壯、濃密、潔白、不易褐化、角質化,具有相當強的抗衰老、抗退化能力,對嚴重衰老、退化的菌種也具有相當強的復壯能力。③該方法制作的母種還可大大延長保藏時間,減少了保存過程中的轉代次數,對抑制菌種退化可起到很大作用。④該方法制作的母種生活力旺盛,轉接到母種、原種或栽培種培養基上的菌種塊萌發快,生長速度明顯快于常規方法所制作的母種。( 佚名)
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